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印迹膜有什么特点

标签：转印膜

生物印迹技术是将待测生物大分子结合到一定固相支持物（微滤膜）上的方法。主要印迹技术有Northern印迹、Southern印迹。生物印迹技术中的印迹膜是专门用于分离和检测生物分子（如蛋白质、核酸、细胞等）的材料。

目录

1、Northern印迹、Southern印迹、Western印迹区别对比

2、印迹膜特性

印迹膜作为印迹技术中的重要固相支持物的主要特性
NC印迹膜、尼龙印迹膜和PVDF印迹膜的区别

3、印迹膜性能验证

4、迈博瑞印迹膜参数

一、Northern印迹、Southern印迹、Western印迹区别对比

	Southern blot	Northern blot	Western blot
定义	用于识别特定DNA序列的程序	Southern blot的改编，通过与互补DNA的杂交来检测特定RNA序列	用于鉴定蛋白质中特定氨基酸序列的印迹程序
开发者	1975年，爱德华	1977年，詹姆斯.阿尔温等人	1979年，乔治.斯塔克
检测到的分子类型	特异性DNA序列	特异性RNA序列	特定蛋白质
电泳	琼脂糖凝胶电泳	甲醛琼脂糖凝胶电泳	SDS PAGE/聚丙烯酰胺凝胶
印迹程序	毛细管转移	毛细管转移	电动传输
探针	DNA探针	cDNA探针	一抗和二抗
样本制备	变性处理	自然状态	自然状态
应用	检测给定样品中特定DNA序列亲子鉴定、DNA指纹图谱受害者识别、识别犯罪遗传疾病和传染因子检测基因重排突变和鉴定	识别给定样品中特定RNA序列有助于疾病的检测基因表达研究	识别给定样品中的蛋白质数量检测血清中病毒或细菌存在检测有缺陷的蛋白质用作某些疾病诊断的明确措施
检测系统	放射自显影、光检测和颜色变化	放射自显影、光检测和颜色变化	检测光线和颜色变化

二、印迹膜特性

1、印迹膜作为印迹技术中的重要固相支持物的主要特性

名称	特点
NC 印迹膜	无支撑布不添加洗涤剂 100% 纯硝化纤维高蛋白结合能力毛细管率与厚度一致背浅
PVDF 印迹膜	耐化学性无变色非易燃高强度疏水性背景浅高蛋白结合
尼龙印迹膜	亲水性高强度高化学耐受性高蛋白结合力

2、NC印迹膜、尼龙印迹膜和PVDF印迹膜的区别

	正电尼龙印迹膜	硝酸纤维素印迹膜	PVDF印迹膜
DNA或RNA截留力	480-600ug/cm2	80-100ug/cm2	125-300ug/cm2
蛋白截留力	500ug/cm2	80-100ug/cm2	100-300ug/cm2
结构强度	柔韧、耐化学试剂，可重复剥离	膜脆、易破碎，不可重复使用	强度高、耐高温、可重复剥离
吸附力	电荷和疏水作用	疏水作用和电荷	疏水作用和电荷
是否需活化	无需活化	无需活化	需要活化
检测方法	放射性标记探针酶抗体偶联物（化学发光、显色、化学荧光）	放射性标记探针直接染色，荧光酶抗体偶联物（化学发光、显色）	直接染色酶抗体偶联物（化学发光、显色）

三、印迹膜性能验证

印迹膜对生物分子的最大吸附能力验证
印迹膜转印生物分子效果验证
印迹膜转印烧穿检测验证
转印膜背景及灵敏度（最低检测限度）验证
转印膜吸附生物分子作用力（疏水和电荷）验证

四、迈博瑞印迹膜参数

名称	湿润性	灵敏度和分辨率	背景	机械强度	溶剂耐受性	水润性	蛋白结合能力	适用染色方法	检测方式
Nylon66印迹膜	亲水性	高	较高	软而结实	较差	缓冲溶液润湿	>400μg/cm2	不能用阴离子染料	不能用阴离子染料，受限制
NC转印膜	亲水性	高	低	干的NC膜易脆	差	缓冲溶液润湿，避免气泡	80-110μg/cm2	胶体金、丽春红、酰胺黑、印度墨汁	常规染色，可用放射性和非放射性检测
PVDF转印膜	疏水性	高	浅	机械强度高	好	100%的甲醇润湿	125-200μg/cm2	胶体金、丽春红、酰胺黑、印度墨汁、考马斯亮兰	常规染色，较于NC膜可用考马斯亮蓝染色，ECL检测和快速免疫检测

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